雙軸細胞拉伸儀是研究細胞在受到機械壓力、拉力或其它機械刺激時的各種形變,目前已經成為一門前沿科學研究項目,為此科學家研發出很多裝置用于拉伸細胞,它可以在體外環境模擬體內的拉伸狀態等條件來滿足以上細胞的生長。
雙軸細胞拉伸儀主要實現模擬細胞在人體內受到的生理牽張環境刺激下的細胞培養,也可以用于模擬非生理狀態下受到的牽張刺激,用來研究不同應變狀態下的細胞應激反應。牽張應變在人體內目前主要有如心肌、肌肉纖維、血管舒張收縮等自主動作對自身及周圍細胞形成影響或者由外部作用如按摩,推拿等外力施加而產生對細胞的影響。
視網膜色素上皮(RPE)是視網膜的基本組成部分,在視覺功能中起著至關重要的作用。視網膜色素上皮的結構和功能受損會導致多種視網膜疾病,目前尚無治療這些疾病的方法。因此,研究視網膜色素上皮的發育、功能與病理生物學之間的關系,對預防和治療視網膜疾病具有重要意義。
視網膜下纖維化是導致年齡相關性黃斑病變視力喪失的原因之一,抗血管內皮生長因子(VEGF)治療是目前對于濕性年齡相關性黃斑變性標準治療方案。實驗計劃通過觀察牽拉力誘導下RPE細胞血管內皮生長因子(VEGF)的表達來探索機械應力對其形成產生的作用。
設計實驗:根據不同大小牽拉力分為對照組(無牽拉力組)、A組(20%形變組)、B組(10%形變組)、C組(5%形變組)。各組依照不同的時間點收取樣本進行檢測。應用實時熒光定量PCR檢測各組不同時間點(0、24、48h)VEGFAmRNA的表達情況,蛋白印跡法檢測(0、24、48h)VEGFA-165的表達以及ELISA方法檢測(0、12、24、36、48h)細胞上清液中VEGFA的分泌。